Cloning and Partial Characterization of the Bacillus thuringiensis dendrolimus T84A1 Insecticidal Crystal Protein Gene

Abstract

B. thuringiensis (Bt) dendrolimus T84A1のプラスミドから、殺虫性結晶蛋白質の遺伝子を大腸菌によってクローン化した。本菌は10.0, 19.3と51.1kbの3種のプラスミドを保有していた。PstI消化で生じた断片をベクターpBR322と連結して大腸菌を形質転換した。結晶蛋白質の抗体と反応し同じ分子量の蛋白質を生産する1株が得られた。これは10.22kbのBtDNAを含む組換えプラスミドをもち、欠失実験と毒素生産能分祈から5kbのHpaI-PstIに領域に遺伝子が認められた。ハイブリダイぜイション分析から、クローン化された遺伝子が最も大きいプラスミドに由来すること、本菌中唯一のものであること、その周辺に何らかの反復配列があることが明らかになった。本遺伝子部はsotto株のそれと類似していたが、5'-隣接部の変化が認められた。